GB 4789.42—2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 诺如病毒检验

GB 4789.42—2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 诺如病毒检验

本标准规定了食品中诺如病毒 (Norovirus)的实时荧光RT-PCR检测方法 。

本标准适用于贝类,生食蔬菜,胡萝卜、瓜、坚果等硬质表面食品,草莓、西红柿、葡萄等软质水果等食品中诺如病毒核酸的检测。

5.1 病毒提取

注:样品处理一般应在4°C以下的环境中进行运输。实验室接到样品后应尽快进行检测,如果暂时不能检测应将 样品保存在-80°C冰箱中,试验前解冻。样品处理和PCR反应应在单独的工作区域或房间进行。每个样品可设置2~3个平行处理。

5.1.1 软质水果和生食蔬菜

5.1.2 硬质表面食品

5.1.3 贝类

5 .2 病毒RNA提取和纯化

注:病毒 RNA 可手工提取和纯化,也可使用商品化病毒 RNA 提取纯化试剂盒。提取完成后,为延长 RNA 保存时 间可选择性加入 RNase抑制剂。操作过程中应佩戴一次性橡胶或乳胶手套,并经常更换。提取出来的 RNA 立 即进行反应,或保存在4 °C小于8h。如果长期储存建议-80 °C保存。

5.2.1 病毒裂解

5.2.2 病毒RNA提取

5.2.3 病毒RNA纯化

5.3 质量控制

5.4 实时荧光RT-PCR